复方黄芪多糖拮抗环磷酰胺对小鼠毒副作用的研究

１

实验研究

复方黄芪多糖拮抗环磷酰胺对小鼠毒副作用的研究

赵莲芳１，郑玉淑２，张善玉１

（１．延边大学医学部，吉林延吉１３３０００；２．延边朝医医院，吉林延吉１３３０００）

方法：对小鼠行大剂量（８５ｍｇ／ｋｇ，２次）环磷酰胺（ＣＹ）腹【摘要】目的：探讨复方黄芪多糖拮抗环磷酰胺对小鼠毒副作用的影响。腔注射，并用复方黄芪多糖腹腔注射预防，以观察复方黄芪多糖对ＣＹ毒副作用的影响。结果：与ＣＹ组比较复方黄芪多糖注射组（１０

２０ｍｌ／ｋｇ）小鼠ＷＢＣ及ＬＭＹ计数明显高于环磷酰胺组（Ｐ＜０．０５），ＧＲＡ比率低于环磷酰胺组（Ｐ＜０．０５），脾脏指数明显高于ＣＹ组ｍｌ／ｋｇ、

结论：复方黄芪多糖具有拮抗ＣＹ对小鼠毒副作用的效应。（Ｐ＜０．０１）。

【关键词】黄芪多糖；人参总皂苷；环磷酰胺文章编号：１００９－５５１９（２００８）０１－０００１－０２

中图分类号：Ｒ２８

文献标识码：Ａ

Ｓｔｕｄｙｏｆｃｏｍｐｏｕｎｄａｓｔｒａｇａｌｕｓｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｉｎｔｈｅａｎｔａｇｏｎｉｚａｔｉｏｎｏｆｓｉｄｅｅｆｆｅｃｔｓｃａｕｓｅｄｂｙｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅｉｎｍｉｃｅ

ＺＨＡＯＬｉａｎ－ｆａｎｇ１，ＺＨＥＮＧＹｕ－ｓｈｕ２，ＺＨＡＮＧＳｈａｎ－ｙｕ１

（１．ＨｅａｌｔｈＳｃｉｅｎｃｅＣｅｎｔｅｒｏｆＹａｎｂｉａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｌｉｎ１３３０００，Ｃｈｉｎａ；２．ＫｏｒｅａｎＭｅｄｉｃｉｎｅＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＹａｎｂｉａｎ，Ｊｉｌｉｎ１３３０００，Ｃｈｉｎａ）【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｃｏｍｐｏｕｎｄａｓｔｒａｇａｌｕｓｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ（Ｃｏ－ＡＳＰ）ｉｎｔｈｅａｎｔａｇｏｎｉｚａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｓｉｄｅｅｆ－

ｆｅｃｔｓｃａｕｓｅｄｂｙｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ（ＣＹ）ｉｎｍｉｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｌａｒｇｅｄｏｓａｇｅｏｆｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ（８５ｍｇ／ｋｇｔｗｉｃｅ）ｗａｓｉｎｊｅｃｔｅｄｉｎｔｏｔｈｅａｂ－ｄｏｍｉｎａｌｃａｖｉｔｙｉｎｍｉｃｅ，ａｎｄｃｏｍｐｏｕｎｄａｓｔｒａｇａｌｕｓｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｗａｓｕｓｅｄｂｙｔｈｅｓａｍｅｗａｙ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｃｏｍｐｏｕｎｄａｓｔｒａｇａｌｕｓｐｏｌｙｓａｃ－ｃｈａｒｉｄｅｓｏｎｔｈｅｓｉｄｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅｇｒｏｕｐ，ＷＢＣａｎｄＬＭＹｉｎ

ｔｈｅｃｏｍｐｏｕｎｄａｓｔｒａｇａｌｕｓｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｉｎｊｅｃｔｉｏｎｇｒｏｕｐｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０５），ＧＲＡｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｄｅｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜０．０５）ａｎｄｔｈｙｍｕｓｉｎｄｅｘｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｃｏｍｐｏｕｎｄａｓｔｒａｇａｌｕｓｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｐｏｓｓｅｓｓｅｓｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆａｎｔａｇｏｎｉｚｉｎｇｔｈｅｓｉｄｅｅｆｆｅｃｔｓｃａｕｓｅｄｂｙｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅｉｎｍｉｃｅ．

【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｃｏｍｐｏｕｎｄａｓｔｒａｇａｌｕｓｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ；Ｔｏｔａｌｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ；Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ环磷酰胺（ＣＹ）是临床上常用的广谱抗肿瘤药物，由于毒副作用较强，临床应用受到一定的限制，尤其，它对造血系统和免疫系统的不良反应会给机体带来极其不良的后果。由于这些毒副作用，使ＣＹ的用量和疗程均受到了限制。为了寻找有效的拮抗化疗剂毒副作用的药物，我们将黄芪多糖配伍人参总皂苷制备复方黄芪多糖注射液，并探讨复方黄芪多糖对ＣＹ致小鼠毒副作用的影响，现报道如下。

２．４对小鼠外周血象的影响：取５０只小鼠，按体重随机分为４

组：空白组、复方黄芪多糖注射液小剂量组（１０ｍｌ／ｋｇ）和ＣＹ组、大剂量组（２０ｍｌ／ｋｇ），适应环境３天后药物组给相应的实验药品，空白组和ＣＹ组腹腔注射生理盐水２０ｍｌ／ｋｇ，共１０天，期间第五天和第八天给药或生理盐水同时腹腔注射ＣＹ（８５ｍｇ／ｋｇ）１次，第十一天眼球取血，加入抗凝试管中，用ＡＢＸ－６０血细胞分析仪（产地：法国）作血常规测定。

１１．１１．２

材料

动物：昆明种小鼠，雌雄兼用，体重（２０±２）ｇ，由吉林省延边试药：膜荚黄芪于２００６年１０月末采集于吉林省和龙市，由

２．５对小鼠免疫器官指数的影响：各组小鼠取血前称重，取血

后分离脾脏和胸腺，分别称重，计算脾指数与胸腺指数。脾指数

＝脾脏重量（ｍｇ）／小鼠体重（ｇ）；胸腺指数＝胸腺重量（ｍｇ）／小鼠

体重（ｇ）。

大学医学部实验动物科提供。

吉林延边大学药学院生药学教研室鉴定为膜荚黄芪（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ

２．６３３．１

统计学处理：应用ＳＰＳＳ１２．０中相应程序对数据进行统计学

处理，两组间均数采用ｔ检验。

结果

ｍｅｍｂｒａｎｅａｃｅｕｓＦｉｓｃｈ．）的干燥根；人参于２００６年１１月末采集于

吉林敦化市，由吉林延边大学药学院生药学教研室鉴定为人参（ＰａｎａｘｇｉｎｓｅｎｇＣ．Ａ．Ｍｅｙ）的干燥根；ＣＹ江苏恒瑞医药股份有限公司；乙醇等试剂均为分析纯。

ＣＹ对小鼠外周血象的影响：各组小鼠外周血象见表１和表

从表１和表２可见，ＣＹ组小鼠外周血ＷＢＣ及ＬＭＹ计数降低（与２。

空白组比较Ｐ＜０．０１），ＬＹＭ比率减少和ＧＲＡ比率升高（与空白组比较Ｐ＜０．０１），但ＲＢＣ、和ＨＧＢ指数和ＭＯＮ比率没有明显影ＰＬＴ、响。复方黄芪多糖腹腔注射小剂量和大剂量组小鼠ＷＢＣ及ＬＭＹ计数均明显高于ＣＹ组（Ｐ＜０．０５），ＧＲＡ比率均低于ＣＹ组（Ｐ＜

２２．１２．２

方法

黄芪多糖（ＡＳＰ）提取与纯化：按文献［１］方法提取精制黄芪人参总皂苷（ＴＧ）提取与纯化：称取干燥粉碎的人参药材

多糖，苯酚－硫酸法［２］测定多糖含量为８３．２％。

０．０５）。３．２

复方黄芪多ＣＹ致小鼠免疫器官指数降低的影响：见表３。

糖腹腔注射各剂量组小鼠脾脏指数明显高于ＣＹ组（Ｐ＜０．０１），复方黄芪多糖腹腔注射各剂量组胸腺指数高于ＣＹ组，但差异无统计学意义。

２３０ｇ，分别加７０％乙醇（８、６倍）回流提取２次（２、２ｈ），滤过，滤液浓缩，过Ｄ１０１大孔吸附树脂柱，收集７０％乙醇洗脱部分，浓

缩，干燥，得４．５３ｇ人参总皂苷（比色法［３］测定含量为６２．９％）。

２．３复方黄芪多糖注射液的制备：称取黄芪多糖２．０ｇ和人参

总皂苷０．４ｇ，加蒸馏水溶解并定容至２００ｍｌ，分装，在１２０℃高温下消毒３０ｍｉｎ，冷却，即可。４讨论

２

表１复方黄芪多糖对小鼠外周血ＲＢＣ、ＷＢＣ、ＰＬＴ、ＬＭＹ、ＨＧＢ计数的影响（ｘ±ｓ）

组别空白组只数给药剂量现代医药卫生２００８年２４卷第１期

酰胺（ａｌｄｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ），再在肿瘤细胞内分解出磷酰胺氮芥

ＲＢＣ（１０－１２／Ｌ）ＷＢＣ（１０－９／Ｌ）ＰＬＴ（１０－９／Ｌ）ＬＭＹ（１０－９／Ｌ）ＨＧＢ（ｇ／Ｌ）（ｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅｍｕｓｔａｒｄ）与细胞的ＤＮＡ发生烷化作用，形成交叉联结，从而抑制肿瘤细胞的生长繁殖［４］。因为ＣＹ与ＤＮＡ的这种作用特别是对增没有特异性，对正常的组织细胞也具有杀伤作用。

殖分化较快的骨髓造血组织、淋巴组织、胃肠黏膜上皮细胞、毛囊和生殖细胞等抑制作用明显。病人多出现骨髓抑制、免疫力低下和脱发等不良反应，而这些毒副作用常成为限制用量和发挥疗效的主要障碍。本实验结果表明，ＣＹ按８５ｍｇ／ｋｇ体重的剂量腹腔注射２次可使小鼠外周血ＷＢＣ及ＬＭＹ计数降低，ＬＹＭ比率减少和ＧＲＡ比率升高。

前期研究表明，黄芪多糖与人参总皂苷联用对ＣＹ腹腔注射（８５ｍｇ／ｋｇ，１次）所致小鼠免疫器官指数降低有明显的拮抗作用［５］，本实验证实复方黄芪多糖腹腔注射也能预防较大剂量另外，本实验结果ＣＹ（８５ｍｇ／ｋｇ，２次）所致小鼠免疫器官萎缩。

表明，复方黄芪多糖对ＣＹ所致小鼠外周血白细胞减少有明显的提升作用。提示复方黄芪多糖腹腔注射对ＣＹ所致小鼠白细胞降低、免疫器官萎缩具有良好的保护作用，具有进一步开发的价值。参考文献：

［１］赵莲芳，郑玉淑，朴惠顺，等．黄芪多糖与人参总皂苷对衰老小鼠的

抗衰老作用［Ｊ］．延边大学医学学报，２００６，２９（４）：２４９．

１２注射用水２１２环磷酰胺８５ｍｇ／ｋｇ×６．８３±２．０５４．９５±１．１８＊＊＊２７０４．７５±６４７．０２３．９３±１．３２＊＊＊８２．１７±２６．６７１．１４１．２８±０．３４６．６１±５２４．４００．９０±０．２２２５７７．８９±２１．３６８７．２２±ＣＹ组大剂量组１２复方黄芪多糖２０ｍｌ／ｋｇ６．７０±１．５９１．９６±０．７１＊＊２４２６．２０±５６８．１４１．５６±０．６２＊＊７９．６２±２３．３１＋环磷酰胺８５ｍｇ／ｋｇ×２小剂量组１２复方黄芪多糖１０ｍｌ／ｋｇ６．６１±１．２０１．９８±０．９６＊＊２５７１．６７±５１８．２４１．５３±０．８５＊＊８２．６７±１４．７１＋环磷酰胺８５ｍｇ／ｋｇ×２注：与ＣＹ组比较，＊＊Ｐ＜０．０１，＊＊＊Ｐ＜０．００１

表２复方黄芪多糖对小鼠外周血ＬＹＭ比率、ＭＯＮ比率和ＧＲＡ比率的影响（ｘ±ｓ）

组别只数给药剂量ＬＹＭ（％）ＭＯＮ（％）ＣＲＡ（％）空白组１２１２注射用水环磷酰胺８５ｍｇ／ｋｇ×２复方黄芪多糖２０ｍｌ／ｋｇ８６．４２±５．１０＊＊＊１１．０８±３．８７２．５８±１．５４＊＊＊７５．６５±４．８５７８．８６±５．０８１３．４０±２．９９１０．４１±３．３３１１．７６±３．６５７．６８±２．４７＊ＣＹ组大剂量组１２＋环磷酰胺８５ｍｇ／ｋｇ×２小剂量组１２复方黄芪多糖１０ｍｌ／ｋｇ７９．４９±５．４７２．８６７．７２±３．１９＊１２．７１±＋环磷酰胺８５ｍｇ／ｋｇ×２注：与ＣＹ组比较，＊Ｐ＜０．０１，＊＊＊Ｐ＜０．００１

表３

组

别

复方黄芪多糖对小鼠免疫器官指数的比较（ｘ±ｓ）

只数

给药剂量注射用水

环磷酰胺８５ｍｇ／ｋｇ×２复方黄芪多糖２０ｍｌ／ｋｇ

脾脏指数

胸腺指数

空白组１２１２１２

５．４９±１．３８＊＊＊２．５３±０．５５１．７５＊＊３．９７±

３．７２±０．５６＊＊＊１．０３±０．５８０．３４０．９１±

ＣＹ组

大剂量组

［２］钟建平，钟春燕，赵道辉，等．苯酚－硫酸法测定保健食品多糖含量［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２００１，１１（６）：６７５．

［３］张全英，施爱明，袁心慧．参麦注射液中人参皂苷含量测定［Ｊ］．中草

药，２０００，３１（１０）：７５０．

２＋环磷酰胺８５ｍｇ／ｋｇ×

小剂量组

１２复方黄芪多糖１０ｍｌ／ｋｇ３．８７±０．９８＊＊１．２６±０．４７

［４］王新禹，梁前进．环磷酰胺的毒副作用机制及应对措施［Ｊ］．药学进

展，２００６，３０（１０）：４５２．

２＋环磷酰胺８５ｍｇ／ｋｇ×

注：与ＣＹ组比较，＊＊Ｐ＜０．０１，＊＊＊Ｐ＜０．００１

［５］张善玉，朴惠顺，申英爱．黄芪多糖与人参总皂苷联用的免疫调节

作用初步研究［Ｊ］．中国药房，２００５，１６（２１）：１６２０．

收稿日期：２００７－０９－１７

安道生、癌得星或癌得散。本品在体外ＣＹ又名环磷氮芥、

无活性，但在体内经肝细胞色素Ｐ－４５０氧化生成中间产物醛磷

尿多酸肽对人胃癌细胞ＳＧＣ７９０１增殖的体外抑制作用

陈

洁，赵清叶，马学真

（青岛大学医学院第二附属医院肿瘤科，山东青岛２６６０４２）

【摘要】目的：研究肿瘤细胞分化诱导剂尿多酸肽（ＣＤＡ－ＩＩ）对人胃癌细胞的体外抑制作用。方法：将ＣＤＡ－ＩＩ胃癌细胞株ＳＧＣ７９０１进行体外培养，观察ＣＤＡ－ＩＩ对人胃癌细胞生长曲线及形态学等方面的影响。以四唑盐（ＭＴＴ）比色法测定培养板中加入ＣＤＡ－ＩＩ后，人胃癌细胞ＳＧＣ７９０１的生物活性。结果：ＣＤＡ－ＩＩ可减缓胃癌细胞的生长和增殖能力，体外实验中ＣＤＡ－ＩＩ剂量为１￣５ｍｇ／ｍｌ，对人胃癌细胞ＳＧＣ７９０１的作用最佳剂量为１ｍｇ／ｍｌ。结论：在体外实验中ＣＤＡ－ＩＩ可抑制胃癌细胞的增殖能力，对人胃癌细胞ＳＧＣ７９０１有显著的抑制作用。

【关键词】尿多酸肽；人胃癌细胞；抑制作用文章编号：１００９－５５１９（２００８）０１－０００２－０３

中图分类号：Ｒ７３

文献标识码：Ａ

ＴｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆｕｒｏａｃｉｔｉｄｅａｇａｉｎｓｔｈｕｍａｎｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌＳＧＣ７９０１ｉｎｖｉｔｒｏ

ＣＨＥＮＪｉｅ，ＺＨＡＯＱｉｎｇ－ｙｅ，ＭＡＸｕｅ－ｚｈｅｎｇ

（ＴｈｅＳｅｃｏｎｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＱｉｎｇｄａｏＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＭｅｄｉｃａｌｃｏｌｌｅｇｅ，Ｑｉｎｇｄａｏ２６６０４２，Ｃｈｉｎａ）

【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆＵｒｏａｃｉｔｉｄｅ（ＣＤＡ－ＩＩ）ｏｎｈｕｍａｎｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｉｎｖｉｔｒｏ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅｅｆ－

ｆｅｃｔｏｆＣＤＡ－ＩＩｏｎｇｒｏｗｔｈｃｕｒｖｅａｎｄｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｆｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅｓＳＧＣ７９０１ｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎｖｉｔｒｏｃｕｌｔｕｒｅ．Ｉｎｖｉｔｒｏｓｔｕｄｙ，ＭＴＴａｓｓａｙｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｂｉｏａｓｓａｙａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｈｕｍａｎｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅｓＳＧＣ７９０１ａｆｔｅｒａｄｄｉｎｇＣＤＡ－ＩＩｉｎｆｏｒ７２ｈ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＴｈｅｇｒｏｗｔｈｓｐｅｅｄａｎｄｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｂｉｌｉｔｙｏｆｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅｓｃｏｕｌｄｂｅｒｅｄｕｃｅｄｂｙＣＤＡ－ＩＩ．ＩｎｖｉｔｒｏＣＤＡ－ＩＩａｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ１￣５ｍｇ／ｍｌ，ｔｈｅｍｏｓｔｅｆｆｅｃｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｗａｓ１ｍｇ／ｍｌ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｉｎｖｉｔｒｏ，ＣＤＡ－ＩＩｈａｓｒｅｍａｒｋａｂｌｅｅｆｆｅｃｔｏｎａｎｔｉ－ｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒ－ｒａｔｉｏｎ，ａｎｄＣＤＡ－ＩＩｓｈｏｗｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇａｃｔｉｏｎｏｎｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆｈｕｍａｎｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓｉｎｖｉｔｒｏ．

【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｕｒｏａｃｉｔｉｄｅ；Ｈｕｍａｎｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒ；Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔ