外周血t淋巴细胞亚群在不同致敏原因哮喘儿童中的表达研究

文章编号：1007 —4287(2019)12 —2074 —03

Chin J Lab Diagn，December,2019, Vol 23, No. 12

外周血T淋巴细胞亚群在不同致敏原因

哮喘儿童中的表达研究

曾建兴，林利平，李国花，黄世杰，蔡明雅，苏银凤

(福建省晋江市医院，福建晋江362200)

摘要：目的探究外周血T淋巴细胞亚群在不同致敏原因哮喘儿童中的表达，旨在为临床的诊断和治疗提供科 学依据。方法选取2016年4月至2018年4月于我院接受治疗的84例哮喘儿童为研究对象，根据致敏原因将所有 患者分为两组，其中观察组为多重致敏，共43例患者，对照组为单一致敏，共41例，比较两组患者的CD4+细胞和 CD8+细胞及两者的比值、Thl细胞和Th2细胞及两者的比值、Tregs细胞和Thl7细胞及两者的比值。结果观察 组患者的CD4+细胞高于对照组患者，CD8+T细胞低于对照组患者，且两者比值更大，Thl细胞和Th2细胞及两者比 值差别不大，Tregs细胞数量差别不大，但Thl7细胞高于对照组，比值低于对照组。观察组患者CD4+细胞为35. 12 士10.22%,008+1'细胞为 22.79士8.74%,004+/008+1'为1.43士0.24,1'111细胞为9.03±4.95%,1'112细胞为 8.69±5.03%,Thl/Th2 为 1. 02士0.08,Tregs 细胞为 2. 11±0. 43%,Thl7 细胞为 1.31 士0• 72%，Tregs/Thl7 为 1.58士0. 29;对照组患者 CD4+细胞为 32. 03±10. 12%,CD8+T 细胞为 25. 83士9. 17%,CD4+/CD8+T 为 1. 15士 0• 31,Thl 细胞为 9. 11土4.88%,Th2 细胞为 8. 71±4. 95%，Thl/Th2 为 1.01 士0. 07,Tregs 细胞为 2.08±0. 39%, Thl7细胞为0. 92±0. 45%,Tregs/Thl7为2. 03士0. 55。结论外周血T淋巴细胞亚群在不同致敏原因哮喘儿童中 的表达略有不同，其中CD4+与CD8+T比值更高，Thl细胞与Th2细胞比值差别不大，Tregs与Thl7比值更低。

关键词：外周血T淋巴细胞；不同致敏原因；哮喘

中图分类号：R562.2

文献标识码：A

Expression of peripheral blood T lymphocyte subsets in children with different sensitization causes ZENG J ian-xing,

LIN Li-ping ,LI Guo-hua ^et aL. {Department of Clinical Laboratory , Jinjiang Hospital 9 J injiang 362200,China)

Abstract ： Objective To explore the expression of peripheral blood T lymphocyte subsets in children with different sensitization causes,aim to provide a scientific basis for clinical diagnosis and treatment. Methods Eighty-four children with asthma who were treated in our hospital from April 2016 to April 2018 were enrolled. All patients were divided in­to two groups according to the cause of sensitization. Among them, the observation group was multiple sensitization, a total of 43 patients,the control group was single consistent,a total of 41 cases. The ratio of CD4+ T cells and CD8+ T cells and the ratio of the two groups,the ratio of Thl cells and Th2 cells and the ratio of the two groups,the ratio of Tregs and Thl7 cells, and the ratio between the two were compared. Results

The CD4+ T cells of the observation

group were higher than those of the control group,and the CD8+ T cells were lower than the control group,and the ra­tio of the two was larger. There was no significant difference in the ratio of Thl cells and Th2 cells,and the number of Tregs cells was not much different,but Thl7 cells were higher than the control group,and the ratio was lower than that of the control group. The CD4+ T cells in the observation group were 35. 12士 10. 22%，the CD8+ T cells were 25. 83士 9. 17% ,and the CD4+ /CD8+ was 1. 43士0. 24. Thl cells were 9. 03士4. 95%，Th2 cells were 8. 69士5. 03% ,and Thl/ Th2 was 1. 02士0• 08. Tregs cells were 2. 11 土0. 43%，Thl7 cells were 1. 31 士0• 72%，and Tregs/Thl7 were 1. 58士 0.29. In the control group，CD4+ T cells were 32. 03土 10.12%，CD8+ T cells were 22. 79士8. 74%，andCD4+/CD8+ was 1. 15士0• 31. Thl cells were 9. 11 士4. 88%，Th2 cells were 8. 71 士4. 95%，and Thl/Th2 was 1. 01 士0. 07. Tregs cells were 2. 08士0• 39%，Thl7 cells were 0• 92士0. 45%，and Tregs/Thl7 were 2. 03士0• 55. Conclusion The expres­sion of T lymphocyte subsets in peripheral blood was slightly different in children with different sensitization causes. The ratio of CD4+ to CD8+ was higher,the ratio of Thl cells to Th2 cells was not much different,and the ratio of Tregs to Thl 7 was lower.

Key words：Peripheral blood T lymphocytes；different causes of sensitization；asthma

(Chin J Lab Dzagrz ,2019,23 ： 2074)

中国实验诊断学 2019年12月第23卷第12期

2075

t检验，计数资料比较用;f2检验，<0.05为差异具 有统计学意义。2

结果

通过对两组患者的CD4+细胞和CD8+细胞比 较可以发现，观察组患者的CD4+细胞与CD8+细胞 比值更大，差异具有统计学意义（P<〇. 05)，见表1。

表1

两组患者的CD4+细胞和CD8+细胞比较CD4+细胞/%35.12士10.2232. 03 士 10.1

2.3840.017

CD8+T 细胞/%22. 79 土 8. 7425. 83 士 9. 17

2.0130.042

CD4+/CD8+T1.43 士 0.241.15 士 0.312.5740.013

哮喘主要是由于大量炎症细胞浸润气道黏膜并 释放炎性介质，使得气道纤毛细胞、上皮细胞坏死导 致的，属于异质性疾病，其主要特征为气道高反应性 和慢性气道炎症，在临床上主要表现为气喘、胸闷、 咳嗽等[1'2]。有研究指出，不同致敏原因（单一致敏

原因和多重致敏原因）的哮喘患者其外周血T淋巴 细胞亚群表达方式不同，但相关报道较少m ,本次研 究目的是探究单一致敏原因和多重致敏原因所导致 的哮喘患者的外周血T淋巴细胞亚群表达方式，现 报道如下。

1资料与方法

1.1 —般资料选取2016年4月至2018年4月于我院接受治疗的84例哮喘儿童为研究对象，年龄 5-14岁，平均年龄8. 52土4. 74岁，男性55例，女性 29例，其中观察组43例，年龄5-13岁，平均年龄 8. 45土4. 38岁，男性28例，女性15例，对照组41 例，年龄5-14岁，平均年龄8. 54±4. 55岁，男性27 例，女性14例，两组患者的年龄、性别无统计学差 异。纳人标准:①两组患者过敏原免疫印迹法试验 显示屋尘螨或粉尘蟥以上;②患者哮喘均非 急性期哮喘;③患者哮喘程度为轻中度;④所有患者 家属均同意参与本次研究。

1.2方法首先准备2 ml肝素钾抗凝血将其分成 两部分，一部分采用流式细胞仪用于测定CD4+细 胞、CD8+细胞以及Tregs细胞亚群：分别取100 pi 的肝素钾抗凝血置于3支试管中并放置到室温避光 环境中，各加人10 W荧光素标记的抗体试剂，孵育 20 min后分别加人500 溶血剂，孵育10 min后 上机，分别计算CD4+细胞、CD8+细胞以及Tregs 细胞的百分比；另一部分用于测定Thl细胞、Th2 细胞以及Thl7细胞亚群：首先进行细胞染色，取24 孔培养板，每孔加人10 离子霉素和2 M佛波酯，将其置于温箱中，调整温度为37X：，孵育1 h，其次 向其中加人1U高尔基抑制剂继续进行孵育，4 h后 取500 pi收集的细胞置于流失专用试管中，依次加 人 5 pi CD4-APC 和 10

IL-17A-PE，使用四色分

选流式细胞仪(产自美国贝克曼库尔特公司，型号为 FC500MPL)进行检测。

1.3 评价指标比较两组患者的CD4+细胞和 CD8+细胞及两者的比值、Thl细胞和Th2细胞及 两者的比值、T

regs细胞和Thl7

2.1两组患者的CD4+细胞和CD8+细胞比较

n

观察组43对照组41

t

P

2.2两组患者的Thl细胞和Th2细胞比较

通过对两组患者的Thl细胞和Th2细胞比较 可以发现，两组患者的Thl细胞和Th2细胞及其比 值差别不大，差异没有统计学意义（P>〇. 〇5)，见表

2。

表2

两组患者的Thl细胞和Th2细胞比较

Thl细胞/%

观察组对照组

Th2细胞/%8. 69士 5. 038. 71 士 4. 951.9450.052

Thl/Th21.02 士 0.081.01 士 0.071.7930. 058

9. 03士4. 959. 11 士4. 881.5530.072

tP

2.3两组患者的Tregs细胞和Thl7细胞比较

通过对两组患者的Tregs细胞和Thl7细胞比 较可以发现，两组患者Tregs细胞差别不大,但观察 组患者Thl7细胞更高，两者比值更低，差异具有统 计学意义（P<〇. 05)，见表3。

表3

两组患者的Tregs细胞和Thl7细胞比较

Tregs 细胞/% Thl7 细胞/%

观察组对照组

Tregs/Thl71.58 士 0.292. 03士0.552.1530.035

2.11 士 0.432. 08士 0.391.6850. 065

1.31 士 0.720.92 士 0.452.2070.030

tP

3讨论

过敏原是导致儿童发生哮喘、引发变态反应的

起点，也是关键所在，哮喘主要经历了致敏、激发、效 应三个阶段，截止最近的一份儿科哮喘调查结果显 示，我国儿童哮喘发病率为〇. 42%-5. 73%，美国报 道指出，室内环境过敏引起的哮喘约占总数的 80%，多种过敏原是发生哮喘的高危因素〜53。

细胞及两者的比

值。

1.4统计学方法采用SPSS19. 0软件对研究中 得到数据进行统计学分析。两组计量结果比较采用

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-

哮喘的发病机制非常复杂，受环境、遗传和免疫

因素多个因素共同影响，目前临床上普遍认为Thl 细胞与Th2细胞的比例失衡是导致哮喘发生的主 要发病机制，本次研究的数据显示，两组哮喘患者的 Thl细胞与Th2细胞及其比例差别不大，差异没有 统计学意义（P>〇. 05)，说明不同致敏原因不会对 哮喘患者体内的Thl细胞与Th2细胞的比例产生 影响，近年来，医学家逐渐重视系统免疫学，强调免 疫系统一体化，指出Thl细胞与Th2细胞的比例失 调用于解释哮喘病过于简单化[6]，因此，本次研究对 患者细胞免疫应答状态进行细化，分析其差异。

本次研究的数据显示，观察组患者的CD4+细 胞增多，CD8+细胞减少，CD4+与CD8+细胞比值更 大，差异具有统计学意义（P<〇. 05)，说明多重致敏 原因会使哮喘患者体内CD4+细胞CD8+细胞的比 例失衡更加严重。T淋巴细胞是细胞免疫的主要执 行者，包含CD4+和CD8+两大细胞亚群，近期有研 究指出，CD4+细胞和CD8+细胞在哮喘的免疫调节 中作用重大，维持机体免疫平衡的关键环节是保持 CD4+细胞CD8+细胞的比值平衡，多重过敏原刺激 与单一过敏原刺激相比，CD4+细胞水平增多， CD8+细胞水平减少，与本次研究的数据一致[7’8]。

Thl7细胞是活化的CD4+T细胞亚群，其能够 促进上皮细胞、支气管纤维母细胞以及平滑肌细胞 的活化，促进IL-6、IL-8的髙表达，加强中性粒细胞 浸润气道黏膜，Tregs细胞作为与Thl7同期发现的 细胞，具有免疫抑制效应，能够分泌TGF-卩和IL-10 降低抗原特异性免疫应答，有研究指出，Tregs细胞 与Thl7细胞的比例失衡也是哮喘的重要作用机制 之一W，本次研究的数据显示，观察组患者Tregs细 胞和Thl7细胞比值更小，差异具有统计学意义（P <0.05)，说明多重致敏原因更容易造成哮喘，当过 敏原增多时，多种过敏原中的蛋白酶活性能够将上

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皮细胞裂解，加速上皮细胞的凋亡，破损的上皮细胞

会分泌IL-25、TSLP等内源性危险信号分子，促进炎症反应的发生[1°]。

单一致敏原因和多重致敏原因导致的哮喘儿童 体内Thl细胞和Th2细胞比例差不大，但CD4+细 胞CD8+细胞的比值更大，Tregs细胞和Thl7细胞 比值更小。

作者简介：曾建兴（1981-),男，研究生，主管检验师，科副主任，研究方向：免疫学、感染病学、产前筛查、老年医学等。参考文献：

[1] 彭先祝，王雪慧.老年哮喘患者外周血T淋巴细胞亚群及〗gE水

平变化及意义[J].山东医药，2016,56(37) :50.

[2] 苗青，刘永革，王燕，等.不同致敏模式支气管哮喘患儿外周

血T淋巴细胞亚群比较及临床意义[_)].中国免疫学杂志，2018,

34(1)：84.

[3] 蔡晓华.匹多莫德对支气管哮喘患儿免疫功能的影响及疗效分析

[J].重庆医学，2014,42(12) ,1508,1511.

[4] 苗青，王燕,任亦欣，等.支气管哮喘患儿外周血不同T淋巴

细胞亚群的表达及其临床意义[J].中国妇幼保健，2017,32(18):

4438.

[5] 秦娥，沈巨信,周国忠，等.老年支气管哮喘患者外周血T淋巴

细胞亚群、血清C反应蛋白、降钙素原检测的临床意义[J].中国 基层医药，2012,19(7):991.

[6] 徐畅，饶花平，金世杰，等.哮喘患儿过敏原及T淋巴细胞亚群

分析[J]_中国医师杂志，2015,17(7) :1078.

[7] 梁瑞韵，伍卫，黄瑾，等.地塞米松对支气管哮喘急性发作患

者外周血T淋巴细胞亚群自噬的影响[J].临床肺科杂志，2012,

17(7)：1195.

[8] 缪华.刘晓蓉.不同呼吸道病毒感染与小儿哮喘发病及细胞因

子、淋巴细胞亚群含量的关系[J].海南医学院学报，2017,23(8):

1088.

[9] 王西华，张祖贻.雷公藤多甙对哮喘患者T淋巴细胞亚群和血清

白细胞介素-5浓度的影响[J].中国中西医结合杂志，2001,21

(1)：25,

[10] 吴百平.张永刚.探究CD4 + T细胞及淋巴细胞亚群在小儿哮喘

中的临床意义[J].中国妇幼健康研究，2016,27(1): 104.

(收稿日期：2018 —12 —1〇1